4ª Etapa - Precipitação do DNA Plasmidial

Question 1

​Precipitação do DNA Plasmidial - Procedimento

Answer 1

Adição de etanol → centrifugar.

Question 2

Precipitação do DNA Plasmidial - Importância

Answer 2

Isso é feito para que os plasmideos solúveis se agrupem.

Question 3

Precipitação do DNA Plasmidial - O que ocorre?

Answer 3

Na presença de álcool → o DNA se agrupa.

Question 4

Centrifugação - Procedimento 3

Answer 4

15m

4° C

13k/rpm

Question 5

Centrifugação - Procedimento → Após

Answer 5

Pellet → grudado tudo no fundo

Vira eles → desprezando o meio → mas mantendo tudo grudado no fundo

Question 6

Quando o DNA se agrupa → após a centrifugação:

Answer 6

DNA → vai formar o pellet no fundo do tubo.

Question 7

DNA - Após formar o Pellet no fundo do tubo:

Answer 7

Jogamos fora tudo que está sobre ele (o álcool) → e seco bem o meu tubo / pellet.

Question 8

​DNA - Após jogar fora o que está sobre o Pellet e secar bem o tubo:

Answer 8

Pellet → é dissolvido.

Question 9

Pellet - Dissolução - 2 formas de dissolver o Pellet:

Answer 9

Água Bi-destilada

EDTA

Question 10

​Água Bi-destilada - Nome “Comercial”

Answer 10

Água Milli-Q / M.Q.

Question 11

Água Milli-Q / M.Q.

Answer 11

Livre de tudo → principalmente nucleases.

Água Destilada → autoclavada, livre de nucleases

Question 12

EDTA - Nome

Answer 12

Ácido Etilenodiaminotetracético

Question 13

EDTA - Característica

Answer 13

Muito difícil de fazer

Question 14

EDTA - Quando o utilizamos?

Answer 14

Quando precisamos ter mais cuidado.

Question 15

EDTA - Importância

Answer 15

Ácido → protege mais o seu DNA → degradando as progresses (???) → inibindo toda e qualquer ação.

Question 16

Pellet - Dissolução → Estocagem

Answer 16

Pode ser estocado à -20º C por tempo indeterminado.