Plasmídeo de Expressão

Question 1

​Plasmídeo de Expressão - Uso

Answer 1

Quando se deseja expressar / produzir proteínas.

Question 2

Plasmídeo de Expressão - Expressão

Answer 2

Proteína

Question 3

Dogma da Vida 3

Answer 3

DNA

transcrito em mRNA

Produção de proteínas

Question 4

Plasmídeo de Expressão vs Plasmídeo de Clonagem

Answer 4

Possui os elementos normais do plasmídeo de clonagem (3 primeiros ítens do slide) + a Região Promotora

Question 5

Plasmídeo de Expressão - Elementos 4

Answer 5

ORI → Origem de Replicação

Gene que confere resistência a antibióticos (amp^R)

Polilynker / MSC → Mútiplos Sítios de Clonagem

Região Promotora

Question 6

Plasmídeo de Expressão - Polilynker / MSC → Função

Answer 6

Interrompe o gene Lac Z

Question 7

Plasmídeo de Expressão - Polilynker / MSC → Localização

Answer 7

Seencontra no meio do Lac Z.

Question 8

​Gene Lac Z - Função

Answer 8

Produz enzima B-galactosidade

Question 9

Plasmídeo de Expressão - Polilynker / MSC → Contém

Answer 9

As Enzimas de Restrição

Question 10

Se tu coloca o o polylinker / MSC que interrompe o Gene Lac:

Answer 10

Ele não é expresso → e a bactéria não desenvolve a enzima que o Lac Z produz (B-galactosidade).

Question 11

Plasmídeo de Expressão - Região Promotora → Localização

Answer 11

Localizada antes do Gene Lac Z.

Question 12

Região Promotora e Gene Lac Z - Para ser sintetizado:

Answer 12

RNApol → reconhece a região promotora do gene Lac Z.

Question 13

Região Promotora - Característica

Answer 13

Regulável → pode ser inibida e induzida.

Question 14

Região Promotora - Inibida / Induzida

Inibida → ?

Induzida → ?

Answer 14

Região Promotora - Inibida / Induzida

Inibida → não é reconhecida → não ocorre a produção da proteína à partir do gene

Induzida → reconhecida e ativada → ocorre a produção da proteína à partir do gene

Question 15

​IPTG - O que é?

Answer 15

Indutor sintético da expressão do gene Lac Z.

Question 16

Plasmídeo de Expressão - Seleção dos Transformantes → Forma diferente:

Answer 16

Por X-gal.

Question 17

Plasmídeo de Expressão - Seleção dos Transformantes → Importância

Answer 17

Nem todas as bactérias que receberam o plasmídeo receberam o plasmídeo com inserto que confere resistência ao antibiótico → precisamos descobrir quem recebeu e quem não recebeu → e por isso utilizamos o X-gal.