Seleção dos Fagos Recombinantes

Question 1

Papel Absorvente - O que é?

Answer 1

Papel que será utilizado para a seleção.

Question 2

Sonda - O que é?

Answer 2

Pequeno segmento de DNA com sequências complementares ao inserto

Question 3

Seleção dos Fagos - 1º Passo

Answer 3

Colocamos um papel absorvente em cima da placa que iremos trabalhar → fazendo como um carimbo.

Question 4

Seleção dos Fagos - Ao fazer como se fosse um carimbo:

Answer 4

Parte das placas de lise irão se transferir para o papel.

Question 5

Seleção dos Fagos - Após parte das placas de lise se transferirem ao papel:

Answer 5

Utilizamos a sonda → colocando-a sobre as placas de lise no papel absorvente.

Question 6

Seleção dos Fagos - Ao colocar a sonda sob e as placas de lise no papel absorvente:

Answer 6

Essa sondas iria se ligar aos insertos por complementariedade de base → elas irão hibridizar.

Question 7

Hibridização de Moléculas de DNA

Answer 7

Fitas 5’ 3’ → ao serem aproximadas → criam pontes de hidrogênio que se complementam.

Question 8

Carimbamos placa de lise com papel absorvente → Colocamos sonda → que se ligam ao inserto (gene de interesse) → Pegamos esse papel:

Answer 8

E fazemos um filme radiográfico.

Question 9

Filme Radiográfico - Ao fazer:

Answer 9

Onde a sonda se ligou → mancha de preto.

Question 10

Filme Radiográfico - Após obter a mancha:

Answer 10

Comparamos a cultura ao filme radiográfico.

Question 11

Marcação - Importância

Answer 11

Para nós permitir identificar na placa onde está o local que foi manchado ao passar o papel filtro pelo filme radiográfico.