Eletroforese - Procedimento Flashcards
Eletroforese - Equipamento
Cuba Eletroforética
Gel - Procedimento
Adicionado na Cuba Eletroforética
Gel - Ao adicionar o Gel na Cuba:
Cuba → ligada a um campo eletroforético → que induz uma corrente elétrica → que propicia a corrida do DNA → em direção ao polo positivo.
DNA - Preparo 1/2
Antes de colocar no gel:
→ Damos peso ao DNA → para que ele afunde no pocinho.
→ DNA → transparente → damos cor.
DNA - Preparo → Tratar amostra com: 2
Glicerol
Azul de Bronofenol
DNA - Preparo → Como? 2
Peso → adição de glicerol.
Damos cor → azul de bromofenol.
DNA Purificado e Preparado - Procedimento
Adicionado no poço → com o auxílio da ponteira de uma pipeta.
DNA Adicionado no poço - O que corre? 2
Cargas Opostas → se atraem.
DNA → negativa → corre pro polo positivo.
Fragmentos de DNA - Tipos 2
Grandes
Pequenos
Fragmentos de DNA - Grande vs Pequeno
Maior → + ? → + ?
Menor → + ? → + ?
Fragmentos de DNA - Grande vs Pequeno
Maior → + pesado → + lento
Menor → + leve → + rápido
DNA - Sentido da corrida:
Fragmentos mais leves → correm na frente.
DNA - “Lei”
A mobilidade dos ácidos nucléicos → em uma matriz em gel → varia inversamente com sua massa molecular.
Azul de Bromofenol - O que ocorre?
Marcador de Corrida → pode deixar um rastro azul quando o DNA correr.
Azul de Bromofenol - Importância
Para não perdermos o DNA dentro da Cuba
Azul de Bromofenol - Cuidado
Seu rastro nem sempre significa que o DNA irá parar em seu risco → sua amostra ainda pode o passar e você a perder.
