Hvilke dyr har hhv. longitudinale og horisontale testikler?
Longitudinale: tyr og vædder Horisontale: hingst, orne og hund
Beskriv overordnet funktion i henhold til sæd for testes, epididymis, acc. kønskirtler og penis
Testes: “fabrik”, spermatogenese
Epididymis: modning og opbevaring
Accesoriske kønskirtler: overfladecoating, metabolske substrater
Penis: leveringssystem, erektion og ejakulation
Hvad er emission og ejakulation? Hvilke nervesystem styrer dette?
Emission: bevægelse af sæd og sædplasma ind i urethra
Ejakulation: bevægelse af sæd ud af urethra (hovedsageligt styret af sympatiske nerveimpulser)
Beskriv hvordan erektionen sættes igang? Hvilket nervesystem er involveret?
Seksuel stimulation -> parasympatiske neuroner frigiver NO, hvilket får små arterier til penis til at dilatere -> vener kompresseres, så blodflow væk fra penis mindskes -> blod akkumulerer i det vaskulære rum i det erektile væv i penis -> penis svulmer op og har erektion
Hvad er spermacytogenesen?
Spermatogonia deler sig til spermatocytter, hvilke deler sig yderligere til spermatider
Hvad er spermiogenesen?
Spermatiderne differentieres til spermatozooer
Hvor ofte frigives GnRH, og hvad producerer LH hos handyr?
Pulsativ frigivelse af GnRH 4-8 gange pr dag, og dermed pulsativ frigivelse af LH og FSH.
LH har effekt på testiklerne -> produktion af testosteron
Hvad er blod-testisbarrierens funktion? Hvad består den overordnet af?
Efter meiosen er sædcellernes overflade fremmed for immunsystemet, så hvis dyret ikke har denne barriere, vil immunforsvaret danne antistoffer. Barrieren består primært af tight junctions mellem sertoliceller
Hvor findes sertoliceller, og hvad er deres primære funktioner?
Ligger inde i basalmembranen i de seminiferøse tubuli, holdt sammen af tight junctions. Har receptorer for FSH og testosteron. Producerer inhibin og androgen binding protein (ABP)
Hvor findes de leydigske celler, og hvad er deres primære funktioner?
Ligger mellem de seminifeørse tubuli. Har LH receptorer. Syntetiserer steroider A(ndrogener) som reaktion på LH-stimulation, pulsativ syntetisering og frigivelse.
Hvilken effekt har FSH ifb. spermatogenesen?
Omdanner testosteron til dihydrotestosteron (DHT), som er mere stabilt. Stimulerer produktionen af ABP og Inhibin. Stimulerer spermatogenesen og frigiver spermatozoer
Hvad er effekten af en hæj koncentration af både, testosteron, E2 og DHT?
De laver negativ feedback på hypothalamus/hypofysen, så produktionen af GnRH nedsættes (og dermed LH og FSH)
Hvilken effekt har androgener?
Stor effekt på sertoliceller, hvor det diffunderer in og udskilles til blodet. Påvirker muskler, accessoriske kønskirtler samt produktion og modning af sæd.
Yder negativ feedback på hypothalamus -> inhibering af LH-frigivelse
Hvad er meningen med at administrere exogent testosteron?
Øger systemisk koncentration -> negativ feedback -> reduktion i LH og endogen testosteronproduktion -> inhiberet spermatogenese. Testiklerne atroferer, fordi de får negativ feedback om at der er nok testosteron
Hvad er meningen med administration af GnRH?
Stimulerer den endogene testosteronproduktion, uden at forstyrre balancen mellem lokal og systemisk androgen.
Hvis det gives kontinuerligt udmattes FSH og LH. Kan bruges til at øge libido hos dyr, der er svære at tappe.
I hvilken rækkefølge udvikles sædceller, og hvor foregår det?
Mitose af spermatogonier basalt i basalmembranen af tubuli semineferi.
Bliver til primære spermatocytter, som undergår meiose i lumen til sekundære spermatocytter. Undergår meiose igen til spermatider, som føres til epididymis
Nævn karakteristika for fertil/vital spermatozoo
Progressiv motilitet (kan bevæge sig fremad/på langs med egen kropslængde)
Normal morfologi (hoved, hals, mellemstykke, hale)
Intakte cellemembraner
Sæd resevoir i hundyret
Capacitation
Acrosomreaktion
Hvad er capacitation og hvad er funktionen?
Nødvendigt for at befrugtningen kan fnde sted. Ændringer i hovedet. Sæden skal befinde sig et bestemt sted i hundyret for at få maksimal fertilitet. Proteiner fra sædplasmaet dækker spermatozooens hoved, dette fjernes for at den kan befrugte.
Hvad er den acrosomale reaktion og hvordan startes den?
Startes ved kontakt til æggets “jelly coat”. Sædets akrosom frigiver dens indhold via exocytose. Gør det muligt for spermatozoet at penetrere zona pellucida.
Hvilke dyr afgiver flere fraktioner under ejakulation, og hvad består de af?
Orne, hingst og hund.
- fraktion: fra accessoriske kønskirtler
- fraktion: sædholdigt fra epididymis
- fraktion: gel-fraktion, laver prop i cervix
Hvilke 4 parametre kigger man på ved makroskopisk vurdering af sæd?
Mængde, konsistens, farve og ekstranøst materiale
Hvilke 4 ting ser man på ved mikroskopisk evaluering af sæd?
Individuel motilitet (i %, “progressiv motilitet”)
Sædmorfologi (normal/abnormal)
Membranintegritet (intakte membraner vil være eosin-negative (hvide) i en eosin-nigrosin farvning)
Koncentration (makler/neubauer kammer)
Sæd er følsomt overfor køling. Hvad bør man gøre med udstyr?
Forvarme det på varmeplade før sædvurdering. 36-37 grader er optimalt
Ved vurdering af sædabnormaliteter kigger man på hvilke to ting, og hvad vil man se ved abnormaliteter?
Lokalisationen: hoved, mellemstykke, hale
Hvor det er opstået: primært (defekt spermatogenese i testis, defekt hoved/mellemstykke).
Sekundært (epididymis, protoplasmiske droplets)
Tertiært (post-ejakulation, loopede haler)
Beskriv råsæd
Ikke fortyndet! Skal bruges indenfor 10-15 minutter. Alle arter
Beskriv frisk sæd
Råsæd tilsat fortynder. Stuetemperatur, skal bruges inden 4 timer efter opsamling
Beskriv køle/transportsæd
Hund og hingst: 5 grader
Orne: 16-18 grader
Holder i 48 timer
Beskriv frostsæd
Opbevares i flydende nitrogen (-196 gr)
Godt til tyr og vædder.
Varierer fra hingst til hingst
Dårligt til orner, stadig forsøgsbasis
Hvad indeholder sædfortynder, og hvad siger EU-lovgivning om antibiose?
Fortyndet sæd SKAL indeholde antibiotika. Man bruger ofte 4-5 præparater og skyder bredt.
Buffer (pH 6,8-7,4, citrate, TRIS, PBS..)
Membranstabilisator (undgå kuldechock, mælkeproteiner, æggeblomme)
Opretholde osmotisk tryk (kulhydrater, proteiner)
Energi (kulhydrater)
Antibiotika
Evt. cryoprotektiva (% iskrystaller)
Hvor langsomt skal sæd køles for at undgå kuldechock?
0,03-0,5 grader pr minut (hingst)
Beskriv forløbet ved fortynding af sæd
Fjern gelfraktionen med et filter.
Fortynd 1:1 inden centrifugering.
Centrifugering fjerner sædplasma og efterlader sæd-pellet i bunden (400G i 15 min). Tilsæt extender og cryoprotektiva.
Hæld på strå, lukkes med pulver i bunden.
Kontrolleret nedkøling/frysning.
Hvad er ejakulat volumen normalt på for en hingst?
30-100 ml
Hvad er koncentrationen af sædceller normalt i hingstesæd, og hvor mange % progressivt motile skal der være?
100-800 mio/ml
> 50% progressivt motile
Beskriv hvordan man tæller koncentrationen af sædceller i laboratoriet
Makler / Neubauer chamber
Dræb sædcellerne ved at dyppe glasset i varmt vand. Afpipetter 10 ul i kammeret, brug 20x forstørrelse, men ikke mere end dette! Tæl antal spermatozoer i 10 felter = koncentration i mio/ml
Hvor stor er inseminationsdosis for hingste, for hhv. råsæd, kølesæd og frostsæd?
(Inseminationsdosis = mindste antal spermatozoer der skal til for at opnå en acceptabel drægtighedsrate)
Råsæd: 500 mio.
Kølesæd: 1000 mio.
Frostsæd: 250 mio.
Antal er progressivt motile.