vf.metodos de transferencia de material genetico

Question 1

en bacterias:

Answer 1

-conjugacion
-transduccion
-transformacion

Question 2

conjugacion

-lederberg y tatum
-el sembrar juntas 2 cepas auxotrofas k12 e.coli se

Answer 2

aislaban en colonias

Question 3

conjugacion

es el proceso de transferencia horizontal de material genetico entre una celula bacteriana donadora y

Answer 3

una receptora mediante el contacto directo o una conexion que las una

Question 4

conjugacion

dna extracromosomico

Answer 4

plasmios

Question 5

proceso mediante el cual el dna es trasnferido de una bacteria a otra mediante un bacterofago (particula fagica transductora, pseudovirion)

Answer 5

transduccion

Question 6

transduccion

tipos

Answer 6

-generalizada
-especializada

Question 7

transduccion

transferencia de cualquiere region del genoma bacteriano

Answer 7

generalizada

Question 8

transduccion

transferencia de loci adyacentes al sitio de integracion del profago

Answer 8

especializada

Question 9

transduccion

tambien se utiliza para designar el proceso mediante el cual el adn exogeno es

Answer 9

introducido en un celula mediante un vector viral

Question 10

transduccion

inicialmente un bacteriofago infecta a una bacteria y puede

Answer 10

integrarse en el genoma bacteriano (profago) manteniendo el ciclo lisogenico antes de activar el ciclo litico(vegetativo)

Question 11

transduccion

el adn puede integrarse al genoma de la bacteria por

Answer 11

recombinacion sitio especifica (homologia de secuencia)

de esta forma permanece en la bacteria de forma establela nueva informacion genetica

Question 12

variacion hereditaria de una celula bacteriana susceptible, originada por la captacion de adn desnudo libre en el medio, con la posterior integracion del adn exogeno en el genoma celular

Answer 12

transformacion

Question 13

celula que ha sido transformada

Answer 13

transformante

Question 14

principio de transformacion por

Answer 14

griffit 1928

Question 15

transduccion

una bacteria muerta se degrada y libera fragmentos de adn al entorno, otra bacteria puede

Answer 15

captar ese ADN

Question 16

estado fisiologico caracteristico limitado en el tiempo que permite captar adn del medio exterior, influido por factores ambientales como:
-densidad celular del cultivo
-t°
-ph
-nutrientes

Answer 16

competencia

Question 17

competencia

es variable en cada especie capaz de

Answer 17

experimentar transformacion

Question 18

competencia

codificada en el genoma o lograda de

Answer 18

forma artificial

Question 19

tipos de transformacion

Answer 19

-natural
-artificial

Question 20

transformacion natural

en algunas especies de bacterias, que cuentan con la maquinaria especifica para llevar

Answer 20

el adn a traves de la membrana

codificada en los genes celulares

Question 21

tranformacion artificial

no esta codificada en los genes celulares, si no que es

Answer 21

inducida por procedimientos en donde las celulas son convertidas en permeables (competentes) atraves de condiciones que normalmente no ocurren en la naturaleza

Question 22

transformacion artificial

muchas bacterias (celulas en general) carecen de sistemas

Answer 22

naturales de transformacion

Question 23

transformacion artificial

se ha conseguido inducir el estado de competencia en celulas que no lo

Answer 23

presentan de forma natural (e.coli)

Question 24

transformacion artificial

estas tecnicas se basan en tratamientos quimicos y fisicos que producen microporos en la celula, lo que permite la

Answer 24

introduccion de dna exogeno de modo bastante eficiente

Question 25

transformacion artificial se puede realizar de forma

Answer 25

-quimica -microinyeccion -lipofeccion -electroporacion -vectores virales -biobalistica

Question 26

quimica las celulas se incuban en hielo como el dna exogeno en presencia de cationes divalente como Ca+ (CaCl) lo cual

Answer 26

prepara las membranas celulares para ser permeables al DNA exogeno

Question 27

quimica enseguida las celulas son incubadas a 42°por 30s (shock termico) lo que causa que el

Answer 27

dna entre en las celulas

Question 28

electroporacion aumento de la permeabilidad de la membrana celular mediante

Answer 28

aplicacion de un campo electrico (10-20kV/cm)

Question 29

electroporacion se forman poros a traves de los cuales puede entrar el dna

Answer 29

exogeno

Question 30

electroporacion una exposicion excesiva a campos electricos puede causar

Answer 30

la muerte celular

Question 31

vectores virales se aprovecha la capacidad natural que tienen los virus de ingresar su informacion genetica a

Answer 31

la celula blanco

Question 32

vectores virales se selecciona un virus adecuado en base a su estructura y se fabrican

Answer 32

(pseudoviriones) conteniendo la info genetica de interes

Question 33

vectores virales pueden obstaculizar la replicacion de

Answer 33

un virus

Question 34

biobalisitica pequeñas particulas de oro o tungsteno cubiertas de adn se

Answer 34

disparan a las celulas

Question 35

biobalisitica algo del material genetico se quedara en las celulas,

Answer 35

transformandolas

Question 36

biobalisitica la eficiencia de trasnformacion es baja, pero la mayoria de las

Answer 36

plantas pueden ser transformadas por este metodo

Question 37

para que queremos incorporar dna exogeno en una celula?

Answer 37

-clonacion in vivo de ese dna exogeno -producir y purificar la proteina para la cual codifica dicha secuencia (ej obtencion de insulina humana a partir de e coli) -estudiar en la celula la expresion de formas alteradas de dicha proteina ej dominios individuales, proteinas de fusion o quimericas, en enfermedades neurodegenerativas, etc -estudiar la carencia de proteinas especificas -crear organismos geneticamente modificados -terapia genica

Question 38

describe una variedad de procesos que pueden usars para producir copias geneticamente identicas en un ente biologico

Answer 38

clonacion

Question 39

clonacion tipos

Answer 39

-dna -proteina

Question 40

clonacion dna

Answer 40

-in vitro/acelular-pcr -in vivo/celular-amplificacion de moleculas de acido nucleico mediante su introduccion asistida por vectores, en celulas en cultivo

Question 41

clonacion proteina

Answer 41

-sistemas de traduccion in vitro -in vivo-celular

Question 42

clonacion proteina produccion de proteinas mediante la introduccion asisitida de vectores en celulas en cultivo, de la informacion genetica requerida para la sintesis de dicha proteina

Answer 42

in vivo, celular

Question 43

clasificacion de vectores

Answer 43

-vector de clonacion -vectorde expresion

Question 44

vector de clonacion su finalidad es almacenar secuencias y permitir la obtencion de grandes cantidades del inserto

Answer 44

vector de clonacion

Question 45

vector de clonacion -capacidad de expresar el dna recombinante -su objetivo es producir un transcrito (rna)o la proteina producto de ese transcrito

Answer 45

vector de expresion

Question 46

vector de clonacion tiene la caracteristica de poseer:

Answer 46

-secuencias que le permiten mantener su replicacion y la del dna que transportan, independientemente del dna genomico -secuencias codificantes para un gen de seleccion, el producto del gen no debe de estar presente en el tejido uorganismo. para metodos geneticos o de seleccion fenotipica -sitios multiples de clonacion

Question 47

-secuencias que le permiten mantener su replicacion y la del dna que transportan, independientemente del dna genomico

Answer 47

origen de replicacion y secuencias reguladoras en su caso

Question 48

-secuencias codificantes para un gen de seleccion, el producto del gen no debe de estar presente en el tejido uorganismo. para metodos geneticos o de seleccion fenotipica

Answer 48

-genes de resistencia (ampicilina) -genes reporteros (lacZ *b-galactosidasa*, gfp *proteina verde fluorescente*, luciferasa, etc -genes que completan defectos nutricionales en cepas mutantes (e.coli trp1, para crecer en medio carente de trp)

Question 49

-sitios multiples de clonacion

Answer 49

permite la seleccion de sitios de restriccion para la clonacion

Question 50

vector de expresion presenta algunas caracteristicas adicionales a las del vectorde clonacion

Answer 50

-secuencias reguladoras -promotor fuerte/debil inducible/no inducible -operador -sitio de union a ribosoma (SUR) -secuencia de termino de la transcripcion -secuenciqa de poliadenilacion -codon de inicio y parode la traduccion

Question 51

-region potenciadora/promotor de CMV, que permite una fuerte expresion constitutiva en muchos tipos de celulas -sitio de poliadenilacion de SV40 (viris vacoulado del simio) -sitio multiple de clonacion

Answer 51

vector pCMVTnT

Question 52

prodecimiento general

Answer 52

1.preparacion del inserto 2.preparacion del vector 3. preparacion de la construccion o constructo final 4. transformacion 5. seleccion de transformante 6.propagacion de tranformantes 7. purificacion de vectores o proteinas recombinantes

Question 53

procedimiento el dna se corta con la o las enzimas de restriccion adecuadas

Answer 53

preparacion del inserto

Question 54

procedimiento el policonector o sitio multiple de clonacion MCS permite emplear cualquier combinacion de enzimas de restriccion

Answer 54

preparacion del vector

Question 55

procedimiento union covalente in vitro del inserto de DNA al vector cortado empleando una ligasa -la especificidad depende del tipo de extremos

Answer 55

preparacion de la construccion

Question 56

procedimiento -una vez que la celula bacteriana ha sido transformada, esta crece en medios de cultivo selectivos solidos -metodos geneticos o de seleccion fenotipica -levantamientos de colonias o placas

Answer 56

seleccion de transformantes

Question 57

procedimiento se seleccionan las colonias de interes y se crecen en medio liquidos

Answer 57

propagacion de transformantes