vid.terapia genica

Question 1

es una tecnologia que utiliza enzimas para cortar y pegar secuencias de adn de interes

Answer 1

tecnoliga de adn recombinante

Question 2

es el proceso de utilizar tecnologia de adn recombinante (adnr) para alterar la composicion genetica del organismo

Answer 2

ingenieria genetica

Question 3

disciplina cuyo objetivo es la cura o control de enfermedades mediante modificacion genetica

Answer 3

terapia genica

Question 4

en el futuo esta tecnica, podria permitir a los medicos tratar un transtorno mediante la

Answer 4

insercion de un gen en las ceulas de un paciente en vez de usar medicamentos o cirugia

Question 5

la tecnica sigue siendo arriesgada y todavia esta bajo estudio para asegurarse de que sea

Answer 5

seguro y eficaz

Question 6

actualmente solo para enfermedades sin otras

Answer 6

curas

Question 7

ensayos clinicos de terapia genica

Answer 7

-anemia depranocitica
-epidermolisis bullosa
-hemofilia
-degeneracion macular asociada a la edad
-aprobacion fda de la primera terapia contra cancer raro de medula osea y linfoma

Question 8

fases de estudios clinicos

Answer 8

1
2
3
4

Question 9

fase 1
¿es seguro?
15-50 sujetos

Answer 9

-primera serie de ensayos en humanos
-voluntarios sanos
-no suele contar con grupo control
-determinar su accion, seguridad, via de administracion y dosis
-farmacodinamia y farmacocinetica

Question 10

fase 2
¿funciona?
50-200

Answer 10

-evaluacion terapeutica, efectividad y seguridad en pocos casos
-identificacion de efectos secundarios
-generalmente tampoco hay grupo control

Question 11

etapa 3
¿es mas eficaz que lo que tenemos actualmente?
500-10 000

Answer 11

-evaluacion en un tiempo mayor (duracion promedio de 3 años) y en diferentes poblaciones
-mayor costo
-evaluacion terapeutica, seguridad y dosis en mayor numero de enfermos
-a menudo, multicentricos

Question 12

etapa 4
¿existen otros usos o beneficios?

Answer 12

farmacovigilancia
-el medicamento ya esta disponible en el mercado
-seguridad y eficaci a largo plazo
-reporte de posibles efectos adversos raros (frecuencia -1/1000)

Question 13

modificacion de la expresion genica

Answer 13

-inhibicion de la expresion
-edicion genica
-adicion genica

Question 14

-knock out
-eliminar (o reducir RNAi) la expresion de genes causantes de la enfermedad
-la terapia antisentido no es estrictamente terapia genica, es terapiia mediada geneticamente

Answer 14

inhibicion de la expresion

Question 15

-reparar el genoma del paciente mediante tecnicas que involucran recombinacion homologa

Answer 15

edicion genica

Question 16

-introducir material genetico exogeno para expresar los genes terapeutica

Answer 16

adicion genica

Question 17

vectores no virales no integrativos

-no se integran en el genoma
-faciles de producir y controlar

Answer 17

alta seguridad

Question 18

vectores no virales no integrativos

-celulas madre y primarias muy resistentes a modificacion genetica
-la expresion transitoria, se pierde con sucesivas divisiones celulares

Answer 18

baja eficacia

Question 19

vectores no virales no integrativos

Answer 19

-alta seguridad
-baja eficacia

Question 20

vectores no virales integrativos

el adn no solo expresar el gen terapeutico, ademas contiene:

Answer 20

-transposon
-nucleasas especificas

Question 21

transposon

Answer 21

requerido para la integracion del adn (sleeping beauty)

Question 22

nucleasas especificas

Answer 22

ZFNs
TALEN
CRISP/cas9

Question 23

secuencia de adn que puede moverse de manera autonoma a diferentes partes del genoma de una celula (transposicion)

Answer 23

transposon

Question 24

transposon

contienen una secuencia central con informacion para la

Answer 24

transposasa, enzima necesaria para la transposicion y en los extremos una secuencia repetida en orden inverso

Question 25

transposon se inegra a un determinado punto del adn, secuencias ricas en

Answer 25

TA

Question 26

transposon la proteina verde fluorescente(GFP) emite fluorescencia en la

Answer 26

zona verde del espectro visible

Question 27

transposon el gen que codifica para esta proteina esta aislado y se utiliza habitualmente en biologia molecular como gen

Answer 27

reporteto

Question 28

transposon se pueden construir quimeras con

Answer 28

otras proteinas

Question 29

nucleasas especificas

Answer 29

generan rupturas en sitios especificos del dna -NHEJ -HR -Citotoxicidad por cortes inespecificos -ZFNs -TALENs -CRISPR/cas9

Question 30

NHEJ (union de extremos no homologos)

Answer 30

inhibicion de la expresion

Question 31

HR (recombinacion homologa)

Answer 31

edicion genica adicion genica

Question 32

-se unen a pequeños dominios de union al dna (3 a 6 ZF de -30 aa c/u) para reconocer una secuencia mas larga (9 a 18pb) -se fusionan con nucleasa mediante un conector de 4 aa

Answer 32

ZFNs (zinc finger nucleases)

Question 33

TALENs (transcriptor activator-like effector nucleases) las proteinas de tipo activador transcripcional (TAL) reconocen secuencias de adn a traves de

Answer 33

un dominio que consiste en numero variable de repeticiones de -34 aa RVD repeat variable di-residue (12-13)

Question 34

TALENs (transcriptor activator-like effector nucleases) parece hacer una correspondencia uno a uno entre la identidad de 2 aa criticos en cada

Answer 34

repeticion y cada base de adn en la secuencia objetivo

Question 35

CRISPR

Answer 35

clustered regulary interspaced short palindromic repeats

Question 36

cas9 crispr associated protein 9

Answer 36

-endoucleada guiada por rna -escinde secuencias que se unen al crRNA (crispr rna), region espaciadora de 20nt

Question 37

gRNA (guide rna)

Answer 37

crRNA/tracrRNA

Question 38

CRISPR/cas 9

Answer 38

-crispr -cas9 -gRNA

Question 39

variantes de cas 9

Answer 39

-dominios nucleasa RuvC y HNH activos independientes (incremento de la especificidad de corte) -dCas9 con ambos dominios nucleasa inactivos para otras aplicaciones (ej silenciamiento/activacion genica)

Question 40

vectores no virales integrativos ventajas

Answer 40

facilidad de produccion ¿seguridad biologica?

Question 41

vectores no virales integrativos limitaciones

Answer 41

-baja eficiencia en celulas diana de relevancia para terapia genica -la region de integracion es al azar (transposon)

Question 42

la desventaja global de los vectores no virales es la baja eficiencia

Answer 42

en la transfeccion

Question 43

vectores virales por otro lado, los virus son muy eficientes introduciendo su propio material genetico en las celulas diana y

Answer 43

utilizando la maquinaria celular para producir nuevas particulas virales

Question 44

vectores virales

Answer 44

-no integrativos -integrativos

Question 45

no integrativos (mayor seguridad/expresion transitoria)

Answer 45

-adenovirus *dsDNA. capacidad de infectar todo tipo de celulas permiten insertos de hasta 8kb

Question 46

integrativos

Answer 46

-retrovirus -adenoasociados

Question 47

integrativos retrovirus

Answer 47

-rna. aplicaciones limitadas a celulas en division -riesgo de recombinacion con otros retrovirus y oncogenes -manipulacion sencilla y prescisa evita esos problemas

Question 48

integrativos adenoasociados

Answer 48

-ssDNA -endocitosis -muy simple y no autonomo que requiere la coinfeccion con adenovirus u otros para replicarse -no esta asociada con ninguna enfermedad conocida -menos inmunogenicos que los adenovirus

Question 49

primeros vectores virales integrativos desarrollados

Answer 49

moloney murine leukemia virus (mlv)-based vectors

Question 50

vectores virales integrativos ventajas

Answer 50

-alta eficacia de transduccion -se integra eficientemente en una amplia gama de celulas humanas -faciles de manipular

Question 51

vectores virales integrativos desventajas

Answer 51

-baja seguridad biologia -baja/nula eficiencia en celulas quiescentes -alta genotoxicidad (alteracion de la expresion de otros genes por insercion)