Lezione 5 Pt. 2: Tecniche Di Manipolazione Del DNA

Question 1

Cos’è la tecnologia del DNA ricombinante?

Answer 1

È una tecnologia che permette di manipolare con estrema precisione il DNA in una provetta

Question 2

Di quali tecniche si avvale la tecnologia del DNA ricombinante?

Answer 2

1)taglio del DNA grazie a nucleari di restrizione
2)legatura del DNA—-> si uniscono molecole di DNA provenienti da origini diverse
3)ibridazione del DNA—-> per trovare sequenze specifiche di DNA
4) elettroforesi su gel —-> separa molecole di DNA di dimensioni diverse
5) PCR
6) clonaggio
7)sequenza entro del DNA

Question 3

A cosa serve la PCR?

Answer 3

REAZIONE A CATENA DELLA POLIMERASI—-> serve per la sintesi del DNA

Question 4

Dimmi 2 scopi per cui si usa il clonaggio

Answer 4

Question 5

Attraverso quale mezzo viene svolto il clonaggio?

Answer 5

Usando i vettori plasmidici—->
*sono piccole molecole di dna a doppio filamento che derivano dai plasmidi dei batteri

Question 6

A cosa serve il sequenziamento del DNA?

Answer 6

Per conoscere la sequenza nucleotidica del DNA e RNA

Question 7

Quali sono le 3 metodologie di sequenziamento del DNA?

Answer 7

1) first generation sequency-metodo Sanger—-> si usano nucleotidi modificati (con 3’H) così la sintesi del DNA si blocca e si ottengono frammenti di diverse lunghezze che vengono separati tramite elettroforesi

2)next generation sequencing- illumina—-> si usano nucleotidi modificati (legati ad una molecola fluorescente) così la sintesi del DNA si blocca e si ottengono frammenti di diverse lunghezze che vengono sanzionati da una tele camera a colori

3)third generation sequencing-nanopore—-> Questo metodo di sequenziamento non richiede amplificazione né la sintesi di DNA.