PCR-Real Time - Taq polimerase ​

Question 1

Taq polimerase - Diferença

Answer 1

Ação Exonucleásica 5’ da sonda

Question 2

Clivagens - Exo vs Endo

Exo → ?

Endo → ?

Answer 2

Clivagens - Exo vs Endo

Exo → Cliva Extremidade

Endo → Cliva Dentro

Question 3

Ação Exonucleasica 5’ da sonda - O que ocorre?

Answer 3

Cliva na extremidade 5’ da sonda

Question 4

Sonda - Definição

Answer 4

Fragmento do nucleotídeos com um R no 5’ e um Q no 3’ → denominada “TaqMan Probe”

Question 5

Extremidade 5’ da sonda - O que contem?

Answer 5

R → de Reporter

Question 6

Extremidade 3’ da sonda - O que contem?

Answer 6

Q → de Quencher / Silenciador

Question 7

Quencher - Função

Answer 7

Silencia o R

Question 8

Reporter e Quencher - O que ocorre?

Answer 8

Quando o R(eporter) está ligado na sonda → a luz que ele emite → é absorvida pelo Q(uencher).

Question 9

Q → tem inveja de R - Analogia

Answer 9

Enquanto R estiver ligado na linha → Q absorve sua energia.

Q é a pessoa negativa → que absorve a energia de R → impedindo o mesmo de brilhar (emitir luz).

Question 10

Taq polimerase - Importância 3

Answer 10

Equipamento → só mostra que amplifica → se tiver luz

Para o equipamento ver luz → deve acontecer algo pra R sair de perto de Q

Quem faz isso → a Taq polimerase

Question 11

Taq polimerase - Descrição da Ação 3

​

Answer 11

Taq → se liga nos Primers (hidroxila livre no C3’)

Ao chegar no R que fica no C5’ → ela o Cliva

Quando o R é clivado → ele fica livre e longe de Q → então ele brilha.

Question 12

R Livre - O que ocorre? 3

Answer 12

R livre → brilho.

Quanto mais R livre → maior o brilho

Quanto mais brilho → mais alta a linha do gráfico