Plasmídeo de Clonagem Flashcards
Plasmídeo de Clonagem - O que são?
São os veículos → para levar o inserto para a célula.
Plasmídeo de Clonagem - Ação das Enzimas
Clivam o plasmídeo → permitindo com que seja adicionado o inserto naquele local clivado.
Plasmídeo de Clonagem - Ação das Enzimas → Local
Depende diretamente da enzima.
Diferentes Vetores de Clonagem
Adequados aos diferentes tamanhos de inserto de DNA alvo a ser clonado.
Plasmídeos - Origem
Bacteriana
Plasmídeos - Morfologia
Moléculas de DNA dupla fita circulares
Plasmídeos - Replicação
Independente do cromossomo bacteriano.
Plasmídeos - Replicação → Como?
Contém todos os elementos necessários para se auto replicarem independentemente do cromossomo bacteriano.
Plasmídeos - Replicação → Elementos Necessários 3
Origem de Replicação (ORI)
Polilynker (MSC)
Marcadores seletivos (gene Amp ou TetA)
A primeira clonagem molecular foi realizada por Mertz e Davis na década de 70, onde um Fragmentos de interesse (inserto) e plasmídeo linearizados com a mesma ER, foram ligados (unidos) pela enzima Ligase, e esta molécula recombinante (inserto ligado ou inserido no plasmídeo) foi introduzida em células vivas, e foi verificado que estas células foram capazes de expressar a informação genética provenientes da molécula recombinante que foi inserida no interior desta célula.
A primeira clonagem molecular foi realizada por Mertz e Davis na década de 70, onde um Fragmentos de interesse (inserto) e plasmídeo linearizados com a mesma ER, foram ligados (unidos) pela enzima Ligase, e esta molécula recombinante (inserto ligado ou inserido no plasmídeo) foi introduzida em células vivas, e foi verificado que estas células foram capazes de expressar a informação genética provenientes da molécula recombinante que foi inserida no interior desta célula.
