Sequenciamento Automatizado - ddNTPs ​

Question 1

dNTPs - Quem são? / Característica 2

Answer 1

Letras pretas → tristes.

Mãozinha → tem hidroxila livre no C3’

Question 2

ddNTPs - Quem são? / Característica 2

Answer 2

Letras felizes → coloridas

Mãozinha → não tem hidroxila livre no C3’

Question 3

ddNTPs - O que são? / Característica 2

Answer 3

Conjugados → ligados a corantes.

Cada letra → tem uma cor.

Question 4

ddNTPs - O que ocorre?

Answer 4

São conjugados a corantes fluorescentes.

Question 5

ddNTPs - Tipos

Answer 5

Adenina → Verde → ddATPs

Timina → Vermelho → ddTTPs

Citosina → Azul → ddCTPs

Guanina → Preto → ddGTPs

Question 6

ddNTPs - Definição

Answer 6

Nucleotídeos de terminação → não possui 3’OH.

Question 7

ddNTPs - Função

Answer 7

Nucleotídeos de Terminação

Question 8

ddNTPs → Nucleotídeos de Terminação - Como funciona?

Answer 8

Não possui 3’OH livre pra fazer a ligação fosfodiester com o próximo nucleotídeo

Ao chegar no ddNTP → reação para → e então um novo fragmento é sintetizado → e assim vai.

Question 9

3’OH - Importância

Answer 9

Necessário para formar a ligação fosfodiéster com o próximo nucleotídeo

Question 10

ddNTPs - Como funciona? / O que ocorre?

Answer 10

Como não possui 3’OH → cada vez que é incorporada a amplificação da fita molde → a mesma é interrompida → gerando fragmentos com terminação prematura.

Question 11

Sequenciamento Automatizado - Importância

Answer 11

TAQpol → pode causar mutação espontânea na PCR.

Sequenciamento → é importante para analisar o amplicon → e determinar se não houve nenhuma mutação espontânea.
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