Sequenciamento Automatizado ​ Flashcards

1
Q

Sequenciamento Automatizado - Outro Nome

A

Método Didesoxi

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2
Q

Método Didesóxi - O que é utilizado?

A

Letras alegres → ddNTPs

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3
Q

Sequenciamento Automatizado - Funções 2

A

Detecta Mutações em Genes Conhecido

Permite analisar cada uma das bases da sequência de DNA em estudo.

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4
Q

Detecta mutações em genes conhecidos - Como?

A

Analisando cada uma das bases (nucleotídeos) contidos no fragmento de DNA em estudo.

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5
Q

Permite analisar cada uma das bases da sequência de DNA em estudo:

A

Da a integridade do nucleotídeo que estamos analisando → mostrando até mesmo uma mutação pontual.

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6
Q

Após a Amplificação Genica:

A

Gene → é submetido ao sequenciamento → para determinação de mutações.

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7
Q

Sequenciamento - Característica

A

Eu não faço sequenciamento → sem antes amplificar o gene na PCR.

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8
Q

Sequenciamento Automatizado - Momento de Aplicação da Técnica 2

A

Extração do DNA → PCR → Eletroforese

Se estiver tudo bem → fazemos → Sequenciamento

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9
Q

Sequenciamento Automatizado - Antes de fazer o sequenciamento: 4

A

Extração do DNA → Analisada com a eletroforese para determinar se está tudo ok.

Compro primers para limitar somente o trecho que eu quero.

PCR → locais complementares ao primer → são anelados e isolados

Após obtermos o nosso DNA isolado → o analisamos na eletroforese

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10
Q

Sequenciamento Automatizado - Durante o sequenciamento:

A

Analisamos nucleotídeo por nucleotídeo → para determinar se ocorreu algo → como uma mutação pontual.

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11
Q

Sequenciamento - O que ocorre? 2

A

Reação de PCR → específica para sequenciamento

Após → levamos amostra para o → Sequenciador

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12
Q

Reação de PCR → específica para sequenciamento - Função

A

Adição de didesóxis → ddNTPs.

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13
Q

ddNTPs - O que ocorre? / Importância 2

A

Adicionados na PCR → para realizar o sequenciamento.

Sem a sua adição → não ocorre sequenciamento.

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