mirkobiologija 1. kolokvij Flashcards

1
Q

o’piši 5 korakov razkuževanja rok

A
  1. dlan ob dlan s prekrižanimi prsti 5x
  2. očistimo po hrbtišču rok s prekrižanimi prsti 5x
  3. členke drgnemo ob dlan
  4. očistimo palec
  5. damo prste skupaj in konice rok drgnemo ob dlan
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

ali razkuževanje ubije vse mikrobe?

A

ne. vedno jih nekaj ostane.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

kaj je v mikrobiološkem laboratoriju prepovedano in kaj moramo ?

A
  • moramo vzdrževati red in čistočo
  • moramo preprečevati okužbo ljudi in kontaminacijo
  • preiskovanega materiala,
  • opreme
  • okolja
  • pustimo v omaricah vrhnej obleke in oblečemo belo haljo, ki je zaprta
  • iammo spete lase
  • okna in vrata so odprta

NE SMEMO

  • kaditi
  • piti, jesit
  • žvečiti čigumi
  • telefonirati
  • hitro se premikati
  • glasno govoriti
  • vstavlajti kontaktnih leč
  • se ličiti
  • z rokami se ne dotikamo obraza, predvsem ne okrog nosu, ust, oči
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

zaščitni ukrepi pri delu s patogenimi mikrobi

A
  • laboratorij s podtlakom
  • komora
  • zaščitna obleka
  • roakvice
  • zaprta okna
  • maska
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

če kontaminiramo pult kaj nareidmo?

A

položimo čez papirnato brisačko, damo čez razkužilo in počakamo najmanj 1h da se posuši.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

predno zapustimo laboratorij anredimo kaj?

A
  • ugasnemo gorilnik
  • preverimo da so zaprte pipe za vodo in ventil za dovod plina
  • počistimo in pospravimo delovno površino
  • očistimo mikroskop in ga pospravimo v omaro
  • haljo pospravimo an ustrezno mesto
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

kaj je bakteriološka zanka?

A

zanka za prenašanje bakterij iz enega na drugo gojišče

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

kaj je elenmajerica?

A

stožčasta steklenica za gojišča

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

kaj je petrijevka?

A

ploščata posoda s pokrovom, v kateri gojimo bakterije

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

kako imenujemo laboratorijski plinski gorilnik?

A

bunsenov gorilnik

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

kaj je termostat oz. inkubator?

A

aparat s kontrolirano temperaturo za gojenje mikrobov

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

kaj ej mikrobiološki laboratorij?

A
  • prostor kjer opravljamo mirkobiološke preiskave
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

razdelitev laboratorijev glede na vrsto mirkobov - po stopnji nevarnosti

A

STOPNJA 1
- nepatogeni mikrobi,
-halja
STOPNJA 2
- mikrobi z zmenro patogenostjo in majhno smrtnostjo
-uspešna zdravila za bolezen
- halja, rokavice, če potrebno maska
STOPNJA 3
- mikrobi z veliko patogenostjo in/ali smrtnostjo
- zdravljenje z zdravili težko in dolgotrajno
- zaščitna komora, podtlak v laboratoriju, kombenzion, zaščitna maska
STOPNJA 4
- najbolj patognei mikrobi, velika smrtnost
- ni zdravila
- podtlak, skafander, zaščitna komora

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

kdaj opravljamo dleo v zaščitni komori in kakšne tipe zaščitne komore poznaš?

A
  • če pri dleu obstaja nevarnost nastanka aerosola
  • ščiti delavca
  • ščiti vzorec in delavca
  • ščiti delavca, vzorce in okolje
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

kaj naredimo če kontaminiramo sebe z mikrobi?

A
  • obvestimo vodjo

- se razkužimo

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

če obstaja nevarnsot kužnega aerosola, nareidmo kaj?

A
  • opozorimo ostale: pozor kužni aerosol
  • zadržimo dih in s čim manj gibi zapustimo laboratorij
  • ko se aerosol poleše (cca 1h) začnemo dekontaminacijo
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

kaj je avtoklav?

A
  • laboratorijska oprema, ki nam sterelizira kužni amterial
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
18
Q

centrifuga, centrifugiranje? kako izražamo hitrost

A
  • hitrost izražamo z obrati an minuto
  • hitros izražamo s pospeški prostega pada
  • centrifugiramo v kiveti. pazi na uravnoteženost
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
19
Q

kaj je maldi-top?

A
  • laboratorijska oprema

- naprava za identifikacijo bakterij

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
20
Q

Katere kriterije upoštevamo pri opisu kolonij?=

A
  • velikost
  • barva
    *sive
    *nepigmentirane.
  • oblika
  • profil
  • rob
  • površina
    *izbočene
    *vdrti centri
    *nagubane
  • konsistenca
  • hemoliza (samo an krvnem agarju)
    *popolna
    *nepopolna
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
21
Q

potek barvanja po Lofflerju

A
  • na predmetnici suspendiramo kulturo v kapljici fiziološke raztopine
  • posušimo razmaz na zraku
  • fiksiramo - preparat potegnemo 3x skozi plamen
  • barvamo 2 minuti z metilenskim modrilom
  • speremo z vodovodno vodo
  • posušimo preparat
  • pogledamo pod imerzijskim objektivom z imerzijskim oljem
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
22
Q

kaj opazujemo ko mikroskopiramo obarvane preparate?

A
  • velikost celic
  • mejhne
  • velike
  • oblika
  • koki
  • paličke (tanke,kratke,dolge)
  • razporejanje
  • posamično
  • v parih
  • v skupkih
  • v grozdih
  • v tetradah
  • v verižicah
  • barva
  • modro
  • vijolično
  • rdeče
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
23
Q

kaj je kultura?

A

gojišče + kolonija

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
24
Q

kako se pripravi razmaz?

A
  1. tekoča kultura
    - kanemo kapljico na predmetnico
    - suspenzijo bakterij razmažemo, 2 mm stran od roba
  2. kultura na trdnem gojišču
    - v kapljico fiziološke raztopine na predmetnici suspendiramo delček kolinje, ki smo ga z bakteriološko zanko posneli iz gojišča
    - razmažemo
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
25
Q

kako fiksiramo razmaze?

A
  • 3x potegnemo skozi plamen
  • kemijska fiksacija
  • s alkoholom, formalinom, acetonom
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
26
Q

kako ločimo barvanja?

A

ENOSTAVNA

  • le eno barvilo
  • po lofflerju
  • metilensko modrilo
  • vidimo temne celice na svetlem ozadju (pozitivno barvanje)
  • negativno barvanje: črnilo obda celice, vidiš svetlo celico na temnem ozadju
  • po pfeifferju
  • karboni fuksin

SESTAVLJENA

  • več barvil
  • simultana
  • več barvil hkrati
  • po Giemsi (krvni razmaz)
  • sukcesivna
  • barvila ena za drugo po vrsti
  • po Gramu (za ugotavljanje tipa bakterijske stene)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
27
Q

priprava nativnega preparata

A
  • tekoče gojišče
  • kanem an predmetno steklce
  • kultura na trdnem gojišču
  • fizo. raztopina na predmetnico (kapljica)
  • z ezo posnameo delček kolonije
  • suspendiranje v fiziološki
  • kapljico pokrijemo s pokrovnim steklcem (ne sme biti mehurčkov)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
28
Q

kakšne so gram negativne in kakšne gram pozitivne bakterije? (zgradba bakterijske stene)

A

GRAMNEGATIVNE

  • iamjo lipidni sloj
  • imajo peptidoglikan (murein)
  • tanek
  • imajo citoplazemsko membrnao

GRAMPOZITIVNE

  • iamjo etidoglikan (murein)
  • debel
  • imajo citoplazemsko membrnao
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
29
Q

opiši postopek barvanja po gramu

A
  • priprava razmaza
  • fiksiranje nad plamenom
  • barvanje z gencianskim vijoličnim
  • fiksaciaj barvila z lugolom
  • razbarvanje z etanolom
  • Kontrastno barvanje s karbolnim fuksinom
    (safraninom)
  • spiranje z vodo
  • sušenje
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
30
Q

kako se obarvajo gram + in kako gram -

A

GRAM+: modrovijolično
*debela celična stena

GRAM-: rdeče
*tanka celična stena

31
Q

mikroskopiranje obarvanih predmetov

A
  • nastavimo imerzijski objektiv
  • dvignjen kondenzator
  • zaslonka povsem odprta
  • kanemo imerzijsko olje na preparat
  • preparat vstavimo an mizico
  • GLEDAMO OD
    STRANI! Z makrometrskim
    vijakom potopimo lečo objektiva
    v imerzijsko olje do predmetnice
  • zelo počasi z mirkometrskim vijakom spuščamo mizico, dokler ne vidimo slike
32
Q

mikroskopiranje nativnih preparatov

A
  • kondenzor nekoliko spuščen
  • zaslonka delno zastrta
  • imerzijsko olje na preparat kanemo
  • vstavimo preparat na mizico
33
Q

kakšne so lahko napake pri barvanju?

A
  • Predebel in pregost razmaz
  • ne moramo opazovati oblike
  • barvanje prestarih kultur
  • stene so okvarjane
  • gram+ se razbarvajo z etanolom
  • premalo razbarvamo
  • gram - vidne kot gram +
34
Q

kaj je kolonija?

A

mikrobi na gojišču

35
Q

kaj ej priamrna kultura

kaj je sekundarna kultura?

A

primarna:
- gledaš’ če je na njej kaj zrastlo

sekundarna kultura:

  • čista kultura
  • ko presadiš kulturo, da kolonije razrečiš - da jih lažje opazuješ
36
Q

kaj gledaš pri primarni kulturi?

A
  1. Raste ali ne
  2. Gostota
  3. Koliko je različnih vrst
  4. Če so zelo tipične za povzročitelja določene bolezni
37
Q

kaj opazujemo pri nativnem preparatu?

A
  • oblika
  • velikost
  • gibljivost
  • pazi an brownovo gibanje = gibanje zaradi tekočega gibanja, ni dejansko gibanje kolonij
38
Q

priprava obarvanih preparatov

A
  • držimo se navodil proizvajalca
  • Po zadnjem spiranju posušimo
  • Na predmetnico napišeš za kateri vzorec gre in da veš na kateri strani je vzorec
39
Q

kaj je dobro da napišeš na dopis, ko pošiljaš nek vzorec v laboratorij?

A
  • lastnik
  • označevalec
  • opis živali
  • ime
  • št. čipa
  • pasma
  • starost
  • teža
  • velikost
  • anamneza
  • prejšnja zdravljenja
  • kdo bo kril stroške
40
Q

kaj je pomembno na področju virologije?

A

preventiva

41
Q

kako se lahko prenaša virus slinavke in parkljevke?

A

50km z aerosolom in vetrom

42
Q

kaj naredimo ko zapustimo virološki laboratorij?

A
  • zamenjamo obleko,
  • se stuširamo,
  • se dezinficiramo,
  • nekaj časa en smemo imeti stik z živalmi,
  • tekoči odpadki morajo iti skozi sterilizacijo
  • V laboratoriju je hepa sistem filtrov –> zadržuje virusne delce
43
Q

viruloška preiskava. kaj je name

A
  • neamen: ugutovit povzročitelja okužbe
  • postaviti je treba etiološko diagnozo - ime in priimek virusa
  • osnovna klasična preiskava: IZOLACIJA
  • osnovno gojišče: celične kulture
44
Q

na kateri 2 stvari razdelimo virološko preiskavo?

A
  • dokaz protiteles

- dokaz prisotnosti virusa

45
Q

kater preiskave delamo ko dokazujemo prisotnost virusa?

A
  • izoloacija
  • imunohistologija
  • elektronski mikroskop
  • molekolarne metode
46
Q

s čim lahko determiniramo izolate?

A
  • z izolacijo

- z molekularnimi metodami

47
Q

ko gledmao virus pod el mikroskopom do kam lahko determiniramo virus in na kaj moramo paziti?

A
  • V vzorcu rabimo veliko količino virusnih partiklov

- Determiniramo do nivoja družine

48
Q

veliksot virusa

A
  • najmanjši 20nm

- največji- 400-450nm

49
Q

s čim lahko določimo le vrsto virusa?

A
  • imunohistologija

- molekularne metode

50
Q

kakšna je osnovna zgradba virusa?

A
  • nuklokapsida
  • notri so nuklinske kisline
  • plašč
  • lipoproteinski
51
Q

katere vzorce odvzamemo živimi živalim?

A
  • kri
  • nativna –> koagulira, dobimo serum
  • kri z antikoagulantom , dobimo vse krvne celice
  • v laboratorij ne sme pridt hemolitična kri, eritrociti ne smejo popokat
  • brisi
  • nosni
  • vaginalni
  • kožni
  • žrelni
  • vzorec mleka
  • ni tako pogost, ker ne povzroča veliko verusov mastitisov
  • punktat, biopsat
  • laringotrahealni vzorec
  • probang metoda
  • respiratorna obolenja
  • blato
  • če sumimo da gre za enterocitna obolenja
52
Q

kako zgledajo brisi za odvzem vzorca

A
  • eprueta s transportnim gojiščem

* stabilizira virus, in zavira razmnoževanje bakterij saj vsebuje antibiotike

53
Q

kdaj delamo probang?

A
  • z njim odvzamemo vzorec za viruloško preiskava
  • če sumimo da gre za slinavko ali parkljevko
  • S čašo postrgamo po sluznici orofarixa,
  • odstranjevanje tujkov
  • nato prepipetiraš v epruveto
54
Q

kakšen je vzorec polne krvi?

A

to je kri z vsemi sestavinami

  • krvna plazma
  • krvne celice
  • brez koagulansa
55
Q

kako pridobimo serum

A
  • v čisto in sterilno eprueto odvzamemo kri
  • pustimo jo stati na sobni T –> kri koagulira
  • s centrifugiranjem ločimo kaogulum in serum
  • serum uporabimo za serološke preiskave,za določanje protiteles
56
Q

odvzem vzorcev pri poginjenih živalih. na kaj moramo paziti?

A
  • odvzem ob sekciji
    *koščki parenhimiskih organov - velikost oreha
    jetra
    vranica
    pljuča
    ledvica
    bezgavke
    *blato, koščki kože, možgani
  • ustrezen transport (1-8 C)
  • transportni medij
    *dodan je antibiotik
  • vzorce odvzamemo s sterilnim priborom
  • vsebino enega vzorca ne smemo kontaminirati z vsebino drugega
57
Q

iz kje s elahko kri odvzema ? koliko?

A
  • količina: 5-10 ml

lab živali

  • iz srca
  • iz očesnega kota

vse živali

  • ušesne vene
  • mamarne vene
  • repne vene
58
Q

kakšen vzorec uporabimo če sumimo da gre za steklino?

A
  • vzorec možganov

* amanov rog –> največja količina virusa

59
Q

kaj je brezprašna komora?

A
  • zagotovi visoko stopnjo čistosti in sterilnosti pri horizontalnem načinu gibanja zraka
  • uporabimo ga za delo v sterilnih razmerah
60
Q

kako obdelamo virusne vzorce?

A
  • homogenizacija koščkov organov vzorca
  • terilnica (dodamo pesek)
  • z mehanskim dezintegratorjem
  • mastikator
  • sonifiaktor
  • suspenzija homogenata (1:10)
  • centrifugiranje
  • filtracija vzorca
  • odstranitev bakterij
61
Q

s čim identificiramo virusne izolate?

A
  • izolacija
    • biološki poskus
    • kokošji zarodek
    • celične kulture
  • elektronska mikroskopija
  • nevtralizacija virusa
  • IF ali IP test
  • ELISA
  • PCR
  • referenčni laboratorij
62
Q

naštejte načine gojenaj virusa oz. inokulacije

A
  • biološki poskus: lab. živali
  • intramuskularna alpikacija
  • intravenozna aplikaciaj
  • intracerebralna apliakcija
  • intraperitonealna aplikacija
  • kokošji zarodek (oplojeno jajce)
  • celične kulture
63
Q

opišite postopek priprave preparata za preiskavo z el. mikroskopom

A
  • pripravimo 10% suspenzijo vzorca v PBS
  • rabimo veliko število virusov
  • kapljico nanesemo na elektronskomikroskopsko mrežo
  • 3mm
  • zlata
  • dadoamo kapljico fiksativa (2,5% gluteraldehid)
  • inkubiramo 5 min
  • preparat kontrastiramo s 3% fosforvolframovo kislino ali svičevim acetatom (sol težkih kovin)
  • preiščemo pod mikroskopom
  • slika je elektronska gostota preparata
64
Q

naštej nujne ‘pogoje za transport vzorcev za viruloško preiskavo

A
  • vzorci so zapakirani v nepredušnih posodah
  • vzorci so označeni
  • vzorce damo v torbo s ledenimi kockami (1-8 C)
  • uporabimo transportno gojišče.
  • antibiotik
  • puferna raztopina za vzdrževanje pH
  • albumini
65
Q

kaj je centrifugirnajee-
opiši vste centrifuhe
vrste rotorjov pri centrifugi

A
  • z njem dosežemo ločevanje posameznih delcev.
  • osnovi del centrifuge je rotor
  • rotorji s stalnim angibom (kotni rotorji)
  • rotorji s sspremenljivim nagibom
  • počasne, hitre in ultracentrifuge (polje vrtenja v vakumu)
  • ene centrifuge imajo haldilne sisteme
66
Q

kako določimo moč centrifugiranja?

A

RFC= (rpm)2 x r x g

rpm= rounds per minure
r= razdalja delca od osi
g= gravitacijski pospešek (0,98 m/s)
67
Q

neposredne in psoredne virusne preiskave

A

NEPOSREDNE

  • dokaz prisotnosti virusa
  • prisotnost virusnega antigena
  • prisotnost virusnega genoma

POSREDNE

  • serološke
  • dokazuje prisotnort specifičnih protiteles proti virusnemo genomu
68
Q

od česa je odvisna uspešnost ločevanja centrifuge?

A
  • radialni pospešek

- gostota medija

69
Q

vrste el. mikroskopov

A
  • presevalni el mikroskop
    (do 1nm razloči)
    -svetlobni el. mikroskop
    (nad 200nm loči)
70
Q

kaj je kalibracija?

A
a je niz operacij za ugotavljanje
povezave med vrednostmi, ki jih kaže
instrument ali merilni sistem, in pripadajočimi
vrednostmi, realiziranimi z etaloni, pod
določenimi pogoji.
71
Q

za kaj je primerno normalno in za kaj reverzno pipetiranje?

A

normalno:
tekočine/reagenti na vodni osnovi

reverzno
viskozne tekočine/reagenti

72
Q

kaj je mikropipeta?

A

je pripomoček za
natančno odmerjanje
tekočin/reagentov majhnih
volumnov (0,1 – 1200 μL)

73
Q

pipetiranje

A
  • nastavni ustrezni volumen
    -namestimo pipetni nastavek
    *čvrsto pritrdimo
    *mikropipeto držimo pokončno
  • potisni bat do prve stopnje
  • – pipetni nastavek
    potopite v tekočino/reagent
  • počasi spusti bat, da se vrne v prvotni položaj
  • previdno
    pritisnite bat do prve stopnje
    in nato še do druge stopnje,
    da iztisnete celotno vsebino
    nastavka. Počakajte ca. 2
    sekundi!
  • bat še vedno držiš na drugi stopnji in dvigneš mikropipeto iz jamice kamor si pipetiral
  • – nastavek
    odstranite s pritiskom na
    pipetni izmetalec