Inf&Imm: ZSO 5 (deel 1) Flashcards
(20 cards)
variatie in grootte en vorm van de antigeenbindende plaats op het antilichaam
- Lage, ondiepe spleet
- brede kloof
antigeenbindingsplaats is afhankelijk van de verbinding
- Kleine chemische verbindingen: bindingsplaats vgl. met de actieve plaats van een enzym
- Grote, intacte eiwitmoleculen: bindingsplaats = uitgestrekt oppervlak
synoniem kruisreactiviteit
multispecificiteit
kruisreactiviteit/multispecificiteit
- Antilichaam dat aan meer dan 1 antigeen kan binden
- Eigenlijk is het antilichaam specifiek voor 1 antigeen maar het 2de past goed genoeg om toch een stabiele binding aan te gaan
ELISA
Enzyme Linked ImmunSorbent Assay
Eigenschappen ELISA test
- Zeer gevoelig
- Eenvoudig
basis van de ELISA test
Enzym is covalent gekoppeld aan een antilichaam om dan direct een antigeen op te sporen of om te binden aan een antigeen-antilichaamcomplex
Methode ELISA
- Plastic plaat met putjes waarin het antigeen aan de binnenkant vastgehecht is
- Serum van patiënt wordt in putjes geïncubeerd
- Relevante antilichamen binden aan het antigeen.
- Plaat wordt gewassen (overtollig serum en irrelevante antilichamen worden verwijderd)
- 2de antilichaam (anti-mens) dat aan het enzym gekoppeld is wordt toegevoegd
- 2de antilichaam bindt aan het antilichaam van de patient
- kleurloos substraat toevoegen
- enzym zet kleurloos substraat om in kleur
Hoe gebeurt de screening van bloeddonoren
In het bloed wordt gezocht naar antilichamen tegen ziekteverwekkers die na infectie/vaccinatie ontstaan
Toepassing ELISA
Syfilis screening
is VDRL (Venereal disease research laboratory test) een goede test?
- test zoekt antilichamen tegen cardiolipine
- gevoelige test
- niet specifiek omdat de antilichamen ook kunnen voorkomen bij mensen met andere infecties/auto-immuunziekten
Specifieke serologische test om syfilis aan te tonen
FTA-ABS: Fluorescent Treponemal Antibody ABSorbed Test
hoe werkt FTA-ABS
- Niet-specifieke antilichamen worden verwijderd mbv. absorptie met niet-pathogene treponemen
- Serum wordt in contact gebracht met T. pallidum organismen op een microscoopglaasje
- Antilichamen die gebonden waren worden zichtbaar gemaakt met FITC gelabeld aan anti-humane IgG-antilichamen.
Doel lateral flow test
bepalen of een bepaald eiwit, antigeen of antilichaam aanwezig is in lichaamsvloeistof
Eigenschappen van de lateral flow test
- gemakkelijk
- geen speciale apparatuur vereist
- relatief goedkoop
voorbeeld lateral flow test
zwangerschapstest
Doel zwangerschapstest
aantonen of HCG aanwezig is in de urine van de mogelijk zwangere vrouw
Methode zwangerschapstest
- Urinemonster aanbrengen aan uiteinde van staafje
- Urine wordt naar binnen gezogen
- 1ste antilichaam: muizenantilichaam gekoppeld aan gekleurde bolletjes, ze binden aan het HCG indien aanwezig
=> complexvorming: HCG-antilichaam-bolletje - 2de antilichaam: gericht tegen een ander epitoop van HCG, bindt aan het complex
- Er verschijnt een gekleurde lijn
- 3de antilichaam: schapenantilichaam dat specifiek is voor het muizen Ig dat aan de bolletjes gebonden is, dit is een controlemechanisme om de resterende bolletjes op te vangen
basis van immunofluorescentie
aan antilichamen zijn fluorescerende stoffen covalent gekoppeld
welke fluorescerende stof wordt het vaakst gebruikt bij immunofluorescentie
FITC: fluoresceïne-isiothiocyanaat
