Inf&Imm: ZSO 5 (deel 4) Flashcards
(22 cards)
doel van labo-onderzoek
- Identiteit van de ziekteverwekker vaststellen
- Gevoeligheid van het MO voor microbiële middelen vaststellen.
Bijkomende doelen van labo-onderzoek
- Diagnose met zekerheid stellen
- Behandeling met rationele basis opstarten
5 benaderingen van microbiologische diagnostiek
- Directe detectie in patiëntmateriaal
- Isolatie en bepalen van biologische effecten
- Analyse microbieel nucleïnezuur
- Specifieke fysische spectra
- Immuunreactie van de gastheer
Manieren van directie detectie in patiëntenmateriaal
- Microscopie (licht en fluorescentie)
- Immunofluorescentie
- Immunologische technieken => antigeendetectie
- snelle directe testen
Toepassing microscopie
- Endoparisitaire infecties
- Pathogene fungi
- Bacteriën
- Bepaalde met virus geïnfecteerde cellen
Kleuringen
- Gram
- Giemsa
- Ziehl-Neelsen
- Optische witmiddelen
Kleuring voor parasieten
Giemsa
Kleuring fungi
Optische witmiddelen
Immunologische technieken (basis)
antilichaam-gelabelde partikels
Isolatie en identificatie van bacteriën en fungi
- Ziekteverwekker kweken op een niet-levende voedingsbodem
=> voedingsbodem is selectief voor de groei van pathogene MO zodat er geen overgroei is van commensale contaminanten
Massaspectrometrie
Geïoniseerde fragmenten van bacteriën en fungi genereren een massaspectrum dat meteen geanalyseerd kan worden door koppeling aan een databank
Methoden om bacteriële gevoeligheid voor antibiotica te bepalen
- Disc diffusion methode
- Verdunningsmethode
Disc diffusion methode
- Standaard concentratie van ziekmakende bacterie in suspensie op agarplaat
- Diskjes worden op de plaat gelegd (in die diskjes zit een vast concentratie antibiotica)
- het antibioticum diffundeert in de agarplaat
- Gevoelige bacteriën groeien niet rond de disk
Verdunningsmethode, doel
De laagste concentratie van een antibioticum die de zichtbare groei van bacteriën remt vaststellen
Hoe microbieel nucleïnezuur detecteren
PCR
Doel PCR
- Specifieke delen van het genoom aanduiden die bepalen om welk MO het gaat
- Virulentiefactoren/resistentiegenen aantonen
voordelen PCR
- Specifiek
- Snel
- Efficiënt
- Minder hoge eisen ivm patiëntmateriaal: enkel de nucleïnezuursequentie moet intact blijven
nadelen van PCR
- Niet de volledige gevoeligheid voor antimicrobiële middelen van het MO en andere relevante eigenschappen worden in 1 test gevangen.
- Onverwachte pathogenen worden niet opgespoord omdat van tevoren bepaald moet worden op welke pathogene MO het onderzoek gericht wordt
next generation sequencing
Sequenties van nucleïnezuren opsporen zonder dat je weet over welk MO het gaat
Hoe kan de immuunreactie van de gastheer gebruikt worden voor diagnostiek
serologie: antilichamen van de IgG, IgM en IgA klasse aantonen mbv. gezuiverd microbieel antigeen in het serum van de patiënt
voordelen serologie
- eenvoudig
- goedkoop
- maakt het mogelijk om een diagnose te stellen als het pathogeen al uit de gastheer verdwenen is
beperkingen serologie
- er is tijd nodig voor er een immuunreactie meetbaar wordt
- relatie tussen aangetoonde antilichamen en actuele klinische ziekte is niet evident
- bij immuungecomprommitteerde mensen is dit niet mogelijk om dat de gastheer dan geen sterke immuunrespons kon genereren
- kruisreacties
